IHC與ICC有什么區(qū)別？

在上世紀(jì)30年代，免疫組織化學(xué)（Immunohistochemistry，簡(jiǎn)稱IHC）的原理就已經(jīng)為人所知，但直到1942年，第一個(gè)IHC研究成果才正式發(fā)表。這也被譽(yù)為免疫熒光技術(shù)的里程碑。哈佛大學(xué)醫(yī)學(xué)院的Albert Coons在《免疫學(xué)雜志》上發(fā)表文章，利用FITC標(biāo)記的抗體來鑒定感染組織中的肺炎球菌抗原。自那以后，組織固定方法、檢測(cè)標(biāo)記和顯微鏡都在不斷改進(jìn)，讓免疫組化成為診斷和研究中的一個(gè)必備工具。

在病理科，利用特異的腫瘤標(biāo)志物，醫(yī)生通過IHC診斷腫瘤是良性還是惡性，確定腫瘤的分期和分級(jí)，并確定細(xì)胞類型和轉(zhuǎn)移的來源，以便找到原發(fā)腫瘤的位置。同樣，IHC也能用于藥物開發(fā)，通過檢測(cè)疾病靶點(diǎn)的上調(diào)或下調(diào)來判斷藥物療效。

免疫組化指的是根據(jù)抗體與抗原特異結(jié)合的原理來檢測(cè)組織切片中的抗原（如蛋白）。immuno的詞根來自操作中所使用的抗體，而histo意味著組織。另一種類似的技術(shù)是免疫細(xì)胞化學(xué)（Immunocytochemistry，簡(jiǎn)稱ICC）。這兩個(gè)詞大家經(jīng)常混著用，看著好像差不多，但實(shí)際上還是有點(diǎn)區(qū)別。

對(duì)于IHC，組織是來自患者或動(dòng)物，經(jīng)過冷凍或石蠟包埋。將這些組織制成約4μm厚的切片，封片后再處理。通過這種方法，研究人員可觀察細(xì)胞組分的定位，同時(shí)維持周圍組織的原先結(jié)構(gòu)。

對(duì)于ICC，大部分細(xì)胞外基質(zhì)及其他基質(zhì)組分被去除，只剩下整個(gè)細(xì)胞來染色。ICC的來源可以是細(xì)胞懸液，來自患者或動(dòng)物（如血涂片、拭子等），或在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行的組織培養(yǎng)細(xì)胞系。

除了生物學(xué)來源，IHC和ICC在樣品處理的程度上也有所不同。ICC需要透化，要么通過固定過程，要么是單獨(dú)的透化步驟，這樣抗體才能與細(xì)胞內(nèi)的靶點(diǎn)相結(jié)合。而IHC可能不要單獨(dú)的透化步驟，這取決于切片的厚度和固定方法。包埋在石蠟中的IHC切片必須進(jìn)一步處理，才能進(jìn)行抗體染色。一旦處理好樣品，IHC和ICC的染色操作就幾乎沒什么差異了。當(dāng)然，就染色而言，根據(jù)所使用的抗體來優(yōu)化還是少不了的。

腫瘤細(xì)胞免疫組化耐藥預(yù)后標(biāo)記

惡性腫瘤免疫組化耐藥預(yù)后標(biāo)記，全套4項(xiàng)：P-gp，GSTπ，TOPOⅡ，Ki-67。

乳腺癌免疫組化耐藥預(yù)后標(biāo)記，全套7項(xiàng)：P-gp，GSTπ，TOPOⅡ，Ki-67，ER，PR，C-erbB-2。

1、P-糖蛋白（P-gp）--藥泵作用--胞膜/胞漿--陽性率越高，對(duì)下列藥物耐藥性越強(qiáng)：阿霉素、柔紅霉素、表阿霉素、米托蒽醌、長(zhǎng)春花堿、長(zhǎng)春新堿、紫彬醇、泰素帝。

2、谷光甘肽S轉(zhuǎn)移酶（GST π）--解毒作用--胞漿--陽性率越高，對(duì)下列藥物耐藥性越強(qiáng)：阿霉素、順鉑、氮芥、環(huán)磷酰胺、瘤可寧。

3、拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱ（TOPOⅡ）--靶點(diǎn)作用--胞核--陽性率越高，對(duì)下列藥物越有效：蒽環(huán)類抗生素和鬼臼毒素類，如VP-16、替尼泊苷、玫瑰樹堿、新霉素、柔紅霉素、表阿霉素、阿霉素、VM26。陽性率高者對(duì) VP-16尤其有效。

4、雌激素受體（ER）--性激素作用--胞核--陽性率越高，腫瘤對(duì)內(nèi)分泌治療越有效，預(yù)后越好。

5、孕激素受體（PR）--性激素作用--胞核--陽性率越高，腫瘤對(duì)內(nèi)分泌治療越有效，預(yù)后越好。

6、C-erbB-2--癌基因產(chǎn)物--胞漿--陽性率越高，腫瘤惡性程度越高。ER、PR 陽性而 C-erbB-2 也陽性者，用三苯氧胺治療效果不好。

7、Ki-67--細(xì)胞增殖標(biāo)志--胞核--陽性率越高，腫瘤增殖越快，惡性程度越高。

Ki-67 為細(xì)胞增殖的一種標(biāo)記，在細(xì)胞周期 G1、S、G2、M 期均有表達(dá)，G0 期缺如，其和許多腫瘤分化程度、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移、預(yù)后密切相關(guān)。

8、PCNA（增殖細(xì)胞核抗原）。

9、CEA 多數(shù)腺癌表達(dá) CEA。

10、Rb ( retinoblastoma 視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤) 基因是腫瘤抑制基因，調(diào)節(jié)細(xì)胞周期。

11、P53 在免疫組化中均為突變型，陽性率越高，預(yù)后約差。野生型半衰期很短。

12、Nm23 是轉(zhuǎn)移抑制基因，其陽性表達(dá)和腫瘤轉(zhuǎn)移呈負(fù)相關(guān)。目前已被廣泛應(yīng)用于乳腺癌、非小細(xì)胞肺癌、胃癌、大腸癌、肝癌、喉癌等多種惡性腫瘤的檢測(cè)。幾乎所有的研究都表明，nm23 蛋白高表達(dá)患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率相對(duì)較低，存活期相對(duì)較長(zhǎng)。

13、E-CaE 鈣粘附蛋白，介導(dǎo)細(xì)胞間粘連作用的跨膜糖蛋白，其功能喪失引起細(xì)胞之間連接的破壞，主要用于腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移方面的研究。

14、PS2 雌激素調(diào)節(jié)蛋白，其表達(dá)和 ER 表達(dá)有關(guān)，可作為內(nèi)分泌治療和預(yù)后判斷的指標(biāo)之一。

15、CK18 低分子量角蛋白，主要標(biāo)記各種單層上皮包括腺上皮，而復(fù)層鱗狀上皮常陰性，主要用于腺癌診斷。

16、CK19 分布于單層上皮和間皮，常用于腺癌診斷，肝細(xì)胞不表達(dá)，而膽管為陽性反應(yīng)。

17、Heppar 1 肝細(xì)胞抗原，正常肝細(xì)胞和高分化肝細(xì)胞癌陽性，低分化肝細(xì)胞癌多弱陽性或陰性。

18、CK20 用于胃腸道腺癌、卵巢黏液性腫瘤、皮膚 Merkel 細(xì)胞癌診斷。鱗癌、乳腺癌、肺癌、子宮內(nèi)膜和卵巢非黏液性腫瘤常陰性。

19、CK7 卵巢、肺和乳腺上皮常陽性，結(jié)腸、前列腺、胃腸道上皮陰性。

20、Villin 絨毛蛋白，正常組織中，villin 通常只表達(dá)于有刷狀緣的細(xì)胞上，如胃腸道上皮細(xì)胞、胰腺和膽管上皮細(xì)胞以及腎實(shí)質(zhì)的上皮細(xì)胞中（特別是近曲小管）。

Villin 在胃腸道癌、胰腺癌、膽囊癌和膽管癌組織中有很高的表達(dá)率，具有明顯腺樣結(jié)構(gòu)的腫瘤上沒有 villin 表達(dá)，則這個(gè)腫瘤為胃腸道、胰腺、膽囊或膽管來源的可能性極低。

乳腺癌也經(jīng)常成為女性患者未知原發(fā)部位轉(zhuǎn)移癌要鑒別排除的一種疾病。因?yàn)樵谵D(zhuǎn)移癌組織上觀察到明顯的 villin 免疫組化陽性染色，則這個(gè)腫瘤就極不可能為乳腺來源。

其他 villin 免疫組化染色通常為陰性表達(dá)的腫瘤還有：如卵巢漿液性癌、尿道移行細(xì)胞癌和前列腺癌。間皮瘤也經(jīng)常為 villin 陰性表達(dá)，因此在一些情況下 villin 還可以作為鑒別間皮瘤和腺癌使用抗體的一種。

但是也有一些非胃腸道來源的腫瘤可表達(dá) villin，如子宮內(nèi)膜樣腺癌、卵巢粘液性癌、腎細(xì)胞癌和小部分肺癌。也有一些專家報(bào)道 villin在部分宮頸內(nèi)膜腺癌病例中表達(dá)。

肝癌的診斷：villin 免疫組化染色可以顯示出毛細(xì)膽管結(jié)構(gòu)，因此它也可能在表達(dá)部分肝癌的管狀結(jié)構(gòu)上很有用。多克隆 CEA 是用于此目的的第一種試劑，而且 CD10（CALLA）在表達(dá)肝癌的該結(jié)構(gòu)上也非常有用。多克隆 CEA、villin 和 CD10（CALLA）在肝癌病例上的表達(dá)，相互之間并沒有任何的沖突，因此如果懷疑肝癌的可能性，建議將這三種抗體共同使用以協(xié)助疑難病例的診斷。

Villin 在神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤的研究上也很有幫助。眾所周知，類癌和胰腺的胰島細(xì)胞腫瘤具有相相似的形態(tài)學(xué)特征，僅在形態(tài)學(xué)上區(qū)分這兩種腫瘤幾乎是不可能的。Villin 在這種情況下特別有用，因?yàn)閾?jù)文獻(xiàn)報(bào)道在 85% 的胃腸道類癌病例中有 villin 的表達(dá)，但在胰島細(xì)胞腫瘤上未見陽性表達(dá)報(bào)道。Villin 在類癌上的表達(dá)通常為胞膜陽性。

另外，有一些證據(jù)表明 villin 在胃和下消化道的小細(xì)胞癌上的表達(dá)率比在其他部位的小細(xì)胞癌上要高。如：肺、食道、膀胱或前列腺等。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，大約有 40% 的肺類癌病例 villin 陽性，在其他一些神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤上，如甲狀腺髓樣癌和少數(shù)的美克爾細(xì)胞瘤上也有 villin 的表達(dá)。

21、MRP1 多藥耐藥相關(guān)蛋白1，影響化療敏感性，和預(yù)后相關(guān)。

22、MDR 多藥耐藥基因

23、TS 胸苷合成酶，是 5-FU 重要作用靶點(diǎn)，如果其高表達(dá)，陽性反應(yīng)++以上，提示腫瘤細(xì)胞對(duì) 5-FU 耐藥。

24、Syn 突觸素 神經(jīng)組織標(biāo)志

25、S-100 神經(jīng)組織標(biāo)志，存在于神經(jīng)組織，垂體、頸動(dòng)脈體，腎上腺髓質(zhì)、唾液腺、少數(shù)間葉組織，常用于神經(jīng)鞘瘤、惡黑、脂肪肉瘤、軟骨腫瘤診斷。

26、NSE 主要用于神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤診斷

27、Chr 嗜鉻素，腎上腺髓質(zhì)含量很高，鑒別腎上腺髓質(zhì)和皮質(zhì)，用于神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤診斷。

28、CKH 高分子角蛋白，主要標(biāo)記鱗狀細(xì)胞腫瘤

29、CKL 低分之角蛋白，主要標(biāo)記單層上皮、腺上皮

30、EMA 上皮膜抗原，糖蛋白，廣泛分布各種上皮及其腫瘤

31、Vim 波形蛋白，間葉組織標(biāo)志

32、P504 甲?；o酶A消旋酶檢測(cè)診斷前列腺癌的敏感性為 97%，特異性為100%。

33、AMACR 的優(yōu)點(diǎn)在于它是癌癥特異性，只存在于癌癥組織。Rubin 稱，AMACR 亦可用作其他癌癥的診斷標(biāo)志物。對(duì)各種癌癥細(xì)胞進(jìn)行檢查后發(fā)現(xiàn)，結(jié)腸直腸癌、卵巢癌、乳腺癌、膀胱癌、肺癌、淋巴瘤和黑素瘤都過度表達(dá) AMACR，以結(jié)腸直腸癌和前列腺癌表達(dá)最高。

34、CD117 胃腸間質(zhì)瘤

35、CD10 作為共同急性淋巴母細(xì)胞型白血病抗原，主要表達(dá)于未成熟淋巴細(xì)胞，在 Burkitt 淋巴癌，慢性髓性白血病等造血系統(tǒng)疾病的診斷中具有應(yīng)用價(jià)值。近幾年來發(fā)現(xiàn)該抗原在造血系統(tǒng)外的某些腫瘤中有表達(dá)，如子宮內(nèi)膜間質(zhì)肉瘤、惡性黑色素瘤等?？贵w在對(duì)腎細(xì)胞癌進(jìn)行診斷和鑒別時(shí)有一定的參考價(jià)值。

36、CD15 是一種細(xì)胞粘附分子，因其對(duì)霍奇金淋巴瘤（HD）中的 R-S 細(xì)胞具有良好的標(biāo)記作用，被認(rèn)為是 HD 的重要標(biāo)志物。除 HD 的鑒別診斷外，對(duì)胃癌、結(jié)直腸癌、甲狀腺癌、乳腺癌等腫瘤 CD15 的表達(dá)研究發(fā)現(xiàn)，CD15 表達(dá)隨癌細(xì)胞分化程度下降、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和臨床分期增高而明顯增高。認(rèn)為 CDl5 的表達(dá)是判斷腫瘤的發(fā)展、預(yù)測(cè)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和預(yù)后的良好指標(biāo)。

免疫電鏡觀察顯示，CD15 抗原主要分布于大腸癌細(xì)胞漿的界膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體及近細(xì)胞核膜處，CD15 可能是通過對(duì)所結(jié)合的鋪基構(gòu)型改變影響和參與腫瘤的形成和轉(zhuǎn)移過程。

37、SMA 平滑肌肌動(dòng)蛋白，標(biāo)記平滑肌

38、CD56 為神經(jīng)細(xì)胞黏附分子，主要分布于大多數(shù)神經(jīng)外胚層來源細(xì)胞，常用于星型細(xì)胞瘤、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤診斷，也是 NK 細(xì)胞瘤的重要標(biāo)志，也標(biāo)記小細(xì)胞肺癌。

39、Des 結(jié)蛋白，廣泛分布于平滑肌、心肌、骨骼肌細(xì)胞和肌上皮細(xì)胞，高分化高表達(dá)、低分化低表達(dá)。

40、MSA 肌特異性肌動(dòng)蛋白，廣泛分布于幾乎所有肌型細(xì)胞中。

41、CD68 存在于骨髓和各神經(jīng)組織的巨噬細(xì)胞，用于粒細(xì)胞白血病、各種單核細(xì)胞來源腫瘤、包括惡性纖維組織細(xì)胞瘤診斷（首選）。

42、CD34 表達(dá)于早期淋巴造血干細(xì)胞、祖細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、胚胎纖維母細(xì)胞和某些神經(jīng)組織細(xì)胞，多用于標(biāo)記血管內(nèi)皮細(xì)胞，血管源性腫瘤的診斷，GIST 80-90%.

43、CD31 也標(biāo)記血管內(nèi)皮。

44、CD44 是一種分布廣泛的跨膜糖蛋白分子，分 CD44s 和 CD44v 兩大類。CD44s 主要作為透明質(zhì)酸受體，結(jié)合透明質(zhì)酸后影響腫瘤的生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。而 CD44v 則主要表達(dá)于轉(zhuǎn)移的腫瘤細(xì)胞。

李道明等用免疫組化 LSAB 法檢測(cè)了 42 例食管鱗癌CD44v 4/5的表達(dá)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組的陽性表達(dá)率為76.19% (16/21)，而非轉(zhuǎn)移組的陽性率為42.86% (9/12)，兩組間有顯著性差異。

癌巢周邊的癌細(xì)胞、肌間浸潤(rùn)的癌細(xì)胞、有核分裂的癌細(xì)胞和癌栓中的 癌細(xì)胞及浸潤(rùn)脈管壁的癌細(xì)胞均呈強(qiáng)陽性表達(dá)。張成武等檢測(cè)了20例正常胃粘膜上皮、43 例異型增生和85 例胃癌組織 CD44v6 的表達(dá)，結(jié)果正常胃粘膜無表達(dá)，而異型增生和胃癌組織陽性率分別為30.2% 和74.1%，其表達(dá)強(qiáng)度與胃癌浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤生長(zhǎng)方式、靜脈和淋巴管侵襲及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。以上結(jié)果均表明，CD44v 的高表達(dá)構(gòu)成了腫瘤細(xì)胞的侵襲性與易轉(zhuǎn)移性。

45、NESTIN 神經(jīng)干細(xì)胞中極為豐富

46、Ost 成骨素，為骨化細(xì)胞分泌。

47、AAT 抗胰蛋白酶 纖維組織細(xì)胞來源腫瘤

48、ACT 抗糜蛋白酶

49、GFAP 膠質(zhì)纖維酸性蛋白 神經(jīng)組織標(biāo)志，多用于星形膠質(zhì)瘤診斷

50、Tg 甲狀腺球蛋白，甲狀腺癌 Tg 陽性。

51、CT 降鈣素 甲狀腺髓樣癌陽性。

52、PH 甲狀旁腺素 甲狀旁腺腫瘤陽性

53、N-myc 表達(dá)增強(qiáng)的小細(xì)胞肺癌和神經(jīng)母細(xì)胞瘤對(duì)化療缺乏反應(yīng)并進(jìn)展快速；

54、bcl-2 耐藥機(jī)理為抗凋亡作用，高表達(dá)者對(duì)多數(shù)抗癌藥物/放射治療耐受。

55、TGA72 腫瘤相關(guān)抗原72，多種惡性上皮性腫瘤表達(dá) TGA72，尤其是乳腺癌、卵巢癌和結(jié)腸癌。正常上皮細(xì)胞、肉瘤、淋巴造血系統(tǒng)腫瘤通常TGA72 陰性。TGA72 抗體用于乳腺癌的研究較多，其高表達(dá)通常與腫瘤體積大、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移瘤細(xì)胞分化差及高增殖活性有關(guān)。

56、GA733 腫瘤相關(guān)抗原，編碼上皮糖蛋白 40，是一種上皮細(xì)胞黏附分子（EP-CAM)，對(duì)上皮細(xì)胞的生長(zhǎng)與分化起著重要作用。多種腫瘤可有 GA733 表達(dá)，尤其是乳腺癌、結(jié)腸癌及肺癌等。

Kubuschok 等采用 GA733 對(duì)非小細(xì)胞肺癌手術(shù)切除淋巴結(jié)中隱匿性微轉(zhuǎn)移灶進(jìn)行檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)隱匿灶的檢出是判斷總生存率的獨(dú)立預(yù)后因子。結(jié)腸癌 GA733 表達(dá)形式與腫瘤預(yù)后有關(guān)，細(xì)胞膜及細(xì)胞漿的表達(dá)預(yù)后較基膜側(cè)的表達(dá)為差。

57、TTF-1 甲狀腺轉(zhuǎn)錄因子-1，TTF-1 表達(dá)于甲狀腺腺上皮和肺的上皮細(xì)胞中。在肺腫瘤研究中發(fā)現(xiàn)，大多數(shù)肺的小細(xì)胞癌、原發(fā)性和轉(zhuǎn)移性肺腺癌、少部分大細(xì)胞未分化肺癌、大多數(shù)非典型神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤免疫組化結(jié)果顯示 TTF-1 陽性，而肺鱗癌及絕大多數(shù)典型類癌 TTF-1 陰性。在甲狀腺乳頭狀腺癌中 TTF-1 亦陽性，而 TTF 在其它組織表達(dá)陰性。據(jù)此認(rèn)為 TTF-1 可用來鑒別肺腺癌與鱗癌，并有助于與肺轉(zhuǎn)移性腺癌的鑒別。

TTF-1 在甲狀腺及其腫瘤中的表達(dá)

TTF-1 主要表達(dá)在甲狀腺濾泡細(xì)胞中和甲狀旁腺的主細(xì)胞中，TTF-1 為甲狀腺分化和甲狀腺球蛋白分泌調(diào)節(jié)的基礎(chǔ)物質(zhì)，可促進(jìn)甲狀腺過氧化物酶、碘/鈉的轉(zhuǎn)運(yùn)，TTF-1 與血清 TSH 的活性有關(guān)，活性的 TSH-R 可增強(qiáng) TTF-1 的表達(dá)。

TTF-1 在良惡性甲狀腺組織中表達(dá)不同，正常甲狀腺和良性腺瘤表達(dá)多，甲狀腺乳頭狀癌與濾泡癌中表達(dá)少，未分化癌中不表達(dá)

TTF-1 在惡性甲狀腺病變中的表達(dá)強(qiáng)度隨年齡增加而增強(qiáng)，而且病變存瘤期長(zhǎng)，復(fù)發(fā)機(jī)率高。

TTF-1 在肺癌中的表達(dá)

75% 的肺非小細(xì)胞癌（NSCLCs）陽性表達(dá)，腺癌（ACs）明顯高于鱗癌（SCC），90% 以上的原發(fā)性小細(xì)胞肺癌（SCLC）表達(dá)陽性，TTF-1 在非小細(xì)胞肺癌（NSCLCs）陽性表達(dá)強(qiáng)度與病人的預(yù)后成呈負(fù)相關(guān)，可作為一項(xiàng)獨(dú)立的預(yù)后指標(biāo)。

肺的典型性類癌（TCS）均為陰性，表明小細(xì)胞肺癌和非小細(xì)胞肺癌可能有一個(gè)不同于 TCS 的共同起源的理論。