血培養(yǎng)標本由護士或醫(yī)師采集，建議有條件的醫(yī)院組建專職采血小組。應制定標準化操作規(guī)程和步驟清單，并對采集人員進行培訓。微生物學實驗室工作人員應定期或不定期對血培養(yǎng)送檢合格率進行評價、并及時反饋。

血培養(yǎng)送檢合格率評價包括：標本標識，送檢血培養(yǎng)瓶的種類、數(shù)量、有無破損、采血量、送檢時間及污染率等。控制污染率≤3%。一旦污染率超過標準，應及時從手衛(wèi)生、采血過程等多方面綜合查找原因，并及時與臨床醫(yī)護人員進行溝通、必要時進行再培訓。一旦懷疑患者為血流感染，應在抗微生物藥物使用之前立即采集血培養(yǎng)標本；對已使用抗微生物藥物的患者，建議在下一次應用抗微生物藥物之前采集標本。

對于懷疑感染性心內膜炎患者，建議立即在10min內采集2-3套血培養(yǎng)（每套血培養(yǎng)包括一個需氧瓶和一個厭氧瓶)，每套采血量16~20ml，如果培養(yǎng)24h未報陽，再采集1-2套血培養(yǎng)。對于兒童應根據(jù)體重調整采血量，見兒童血培養(yǎng)共識。對于中性粒細胞減少癥患者，采血總量不應超過患者全血量的1%（人體血液量約70ml/g)。在任何情況下，對成人患者只采1瓶血培養(yǎng)是不能接受的。

采血量是影響血培養(yǎng)陽性率最重要的因素，保證足夠血量可以采用雙側穿刺、每側2瓶（需氧瓶+厭氧瓶)。之前研究表明，單點一次抽血采集足夠血液總量同時接種所要求的血培養(yǎng)瓶，與多點采血的性能和靈敏度相當，但沒有被后續(xù)共識或指南采納。對感染性心內膜炎推薦在24h內至少進行3次穿刺采樣。一般每瓶8~10ml血液，禁止過少或過多，當每瓶血液少于5ml時，可能會出現(xiàn)假陰性或微生物生長延遲。當每瓶超過10ml時，可能會因為白細胞產(chǎn)生了大量的本底CO2，而造成培養(yǎng)假陽性。

血培養(yǎng)陽性后需要隨訪，看是否轉陰，特別是在以下情況，須再次采集血培養(yǎng)。包括：

(1)感染性心內膜炎；

(2)骨髓炎；

(3)金黃色葡萄球菌菌血癥：

(4)念珠菌菌血癥等，

建議選擇外周靜脈進行穿刺采血，除非需要診斷CRBSI,否則不建議從留置的靜脈或動脈導管采集血標本。切忌在靜脈輸液側肢體采集血培養(yǎng)。如果患者輸液無法停止，應在對側肢體采集血培養(yǎng)標本。臍帶血血培養(yǎng)血量為1ml，直接注入需氧血培養(yǎng)瓶或兒童瓶，不常規(guī)進行厭氧培養(yǎng)。極特殊情況可以選擇動脈穿刺采血，動脈血在污染率和檢測敏感性力面與靜脈血相似。通過預先留置的導管取樣會增加污染風險，但從新置入的靜脈導管(1h內)采集，其污染率與外周靜脈并無差異。

對預置導管患者，如果疑似CRBSI，在準備拔除導管的情況下建議在拔出導管的同時，送檢2套外周靜脈血培養(yǎng)和導管尖端5cm進行半定量培養(yǎng)。在不拔出導管的情況下建議至少同時采集2套血培養(yǎng)，一套從外周靜脈，另一套從導管采血；對于多腔靜脈導管，樣本應取自所有管腔（每個管腔取相同體積)，分別進行血培養(yǎng)。單獨送檢經(jīng)導管抽取的血液或單獨送檢導管而不配套采集經(jīng)皮穿刺血培養(yǎng)不能判斷CRBSI。

建議采集者在采集前進行手衛(wèi)生消毒，并且佩戴適當大小的一次性手套或無菌手套。去除血培養(yǎng)瓶上的塑料帽，用75%酒精消毒血培養(yǎng)瓶頂部塑膠塞，自然干燥60s；再對擬采血部位進行皮膚消毒，可根據(jù)患者的年齡、過敏史等選用碘伏、≥2gL氯己定-乙醇(70%)溶液、70%~80%乙醇溶液、70%異丙醇等消毒劑。消毒擦拭方法、時間和等待干燥的時間嚴格遵循產(chǎn)品的使用說明，建議成人皮膚消毒面積直徑為6~7cm。皮膚消毒后血管穿刺前不能再次觸診靜脈（如有必要，應戴無菌手套）。

建議使用注射器或蝶形針采血，按照瓶上的刻度線采集到推薦的血量。使用注射器采集血液后勿換針頭，直接注入血培養(yǎng)瓶、如果采血量充足、先注入?yún)捬跗浚僮⑷诵柩跗?；如果抽血量少于推薦的血量，應優(yōu)先保證需氧瓶的血量達到8ml，剩余的血液接種到厭氧瓶。使用蝶形針采血，采集過程中應保持培養(yǎng)瓶直立放置，位置低于患者手臂、先注入需氧瓶，再注人厭氧瓶。血液注入血培養(yǎng)瓶后，立即輕輕上下傾倒幾次混勻，以防血液凝固，穿刺采集第2套血培養(yǎng)標本時應更換注射器針頭或蝶形針。

建議根據(jù)臨床初步診斷選擇需氧瓶、厭氧瓶、兒童瓶、真菌培養(yǎng)瓶和分枝桿菌培養(yǎng)瓶。大多數(shù)念珠菌可以在需氧瓶中生長，一些念珠菌（如光滑念珠菌)在厭氧瓶生長更快?？紤]除酵母菌以外的其他真菌引起的血流感染時，需增加一個真菌培養(yǎng)瓶。對于已經(jīng)接受抗微生物藥物治療的患者，建議使用含抗微生物藥物吸附劑或中和劑的培養(yǎng)瓶。有添加劑的培養(yǎng)瓶可以培養(yǎng)出更多微生物，特別是葡萄球菌和酵母菌。

在血培養(yǎng)標本采集完成后，建議立即貼上標簽、標簽的位置勿遮蓋培養(yǎng)瓶條碼及血量檢測區(qū)、并注明采集時間（精確到分鐘）。

建議將血培養(yǎng)瓶放入專門的標本運送容器內，防止其掉落和互相碰撞。如果通過氣動管道系統(tǒng)運送，事先應評估血培養(yǎng)瓶放置是否足夠牢固。建議血培養(yǎng)標本在采集后2h內（最遲不超過4h）送至實驗室，室溫(20~25C)運送，運送條件須符合生物安全要求。如果運送延遲，應置于室溫(20-25℃)保存，切勿冷藏或冷凍。

對于所有超過2h接收的血培養(yǎng)瓶，須注意觀察其生長指標，例如傳感器的顏色、溶血、氣體、渾濁度等，如果涂片染色發(fā)現(xiàn)有細菌生長，應與陽性瓶一樣對待。

不能提供24h樣本接收服務的實驗室，可以在臨床科室（如急診、重癥監(jiān)護室)設立小型的血培養(yǎng)系統(tǒng)，即“衛(wèi)星血培養(yǎng)”，但應遵循一定的生物安全管理要求。文獻表明，衛(wèi)星血培養(yǎng)從樣本收集到陽性報警平均縮短10.1h，臨床首次藥物處方調整時間也由原來的64h縮短為42.8h。