這兩天，

經(jīng)歷了第一批“網(wǎng)格化”篩查的市民發(fā)現(xiàn)，

有些小區(qū)已經(jīng)重新進(jìn)入“決賽圈”，

有些研判下來還是有風(fēng)險(xiǎn)的，

則延長了管控時(shí)間。

其中起到關(guān)鍵作用的，

是一份份核酸報(bào)告。

對于市民來說，核酸檢測看似只有兩步：登記采樣，等待數(shù)小時(shí)后在健康云App上查詢結(jié)果。事實(shí)上，在這看似輕松的兩步背后，還凝聚了基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室（PCR實(shí)驗(yàn)室）檢驗(yàn)人員的大量工作。

進(jìn)入PCR實(shí)驗(yàn)室必須“全副武裝”。新民晚報(bào)記者 徐程 攝（下同）

凌晨2時(shí)，這座城市的萬家燈火早已熄滅，而申城各家核酸檢測實(shí)驗(yàn)室依舊燈火通明。一位位身著厚重防護(hù)服的檢驗(yàn)人員，正在實(shí)驗(yàn)臺前一絲不茍地進(jìn)行核酸樣本的檢測，汗水不住地從額滲出，嘴里呼出的熱氣模糊了護(hù)目鏡。

待檢測的核酸標(biāo)本堆了滿滿一桌子

采樣后，你的樣本經(jīng)歷了怎樣的“奇幻漂流”之旅？新民晚報(bào)記者近日走進(jìn)同濟(jì)大學(xué)附屬東方醫(yī)院南院檢驗(yàn)科PCR實(shí)驗(yàn)室，吳文娟主任為大家揭秘一份準(zhǔn)確的核酸報(bào)告是如何誕生的。

標(biāo)本擁有了“身份證”

“醫(yī)生，我今天在你們醫(yī)院做的核酸什么時(shí)候有結(jié)果呀？還要多久呀？”

“醫(yī)生，我急需核酸報(bào)告，能加急幫我檢測一下嗎？”

這幾天，申城各醫(yī)療機(jī)構(gòu)的醫(yī)務(wù)人員總會接到這樣的問詢電話。很多人以為，核酸采樣后，直接用機(jī)器檢測很快就能出結(jié)果了。其實(shí)，從采樣護(hù)士在你的鼻部或咽部“輕捻慢攏”后，后續(xù)還包括了樣本簽收、核酸提取、核酸轉(zhuǎn)移、核酸擴(kuò)增、結(jié)果審核等步驟。

核酸檢測樣本采集后，采集人員會清點(diǎn)數(shù)目，并用密封袋包裝好，用消毒劑噴灑消毒，然后放進(jìn)樣本轉(zhuǎn)運(yùn)箱，由專人送到核酸檢測實(shí)驗(yàn)室。檢測人員收到樣本后會先對轉(zhuǎn)運(yùn)箱消毒，并在開啟后對轉(zhuǎn)運(yùn)箱內(nèi)壁和標(biāo)本采集密封袋二次消毒，之后才是拆開密封袋取出樣本。

“核酸的采集管上都有條碼信息，簽收人員要理清樣本來自哪一個(gè)社區(qū)或人群，是單采還是混采?！眳俏木瓯硎荆傲硗?，我們還會留意樣本上的時(shí)間，便于日后需要時(shí)回溯?！?/span>

之后，核酸樣本就將經(jīng)歷“奇幻漂流”的第二步——要有“身份證”啦！檢驗(yàn)人員則將這一步稱為“樣本前處理”?！癙CR反應(yīng)是在96孔板上實(shí)現(xiàn)的，每一個(gè)孔位都有自己獨(dú)一無二的身份?！眳俏木暾f。

檢驗(yàn)人員為剛剛送到的樣本進(jìn)行編號和信息錄入工作

看似只是“前處理”，但防備之心可是一點(diǎn)兒也不能松。檢驗(yàn)人員要識別空管或溢灑情況的發(fā)生。尤其在大人群10:1混采時(shí)，小小的試管被拭子擠滿，一旦陽性樣本出現(xiàn)了溢灑，一方面可能造成其他樣本結(jié)果的污染（假陽性），另一方面對實(shí)驗(yàn)室的生物安全產(chǎn)生威脅——這也是PCR實(shí)驗(yàn)室的檢驗(yàn)人員同樣要穿成“大白”模樣的原因——醫(yī)用帽子、N95口罩、面屏、護(hù)目鏡、醫(yī)用防護(hù)服、隔離衣、一次性鞋套、兩層手套，這些“束縛”卻能給檢驗(yàn)人員創(chuàng)造最安全的環(huán)境。

此外，PCR實(shí)驗(yàn)室要求嚴(yán)格分區(qū)，最好是負(fù)壓實(shí)驗(yàn)室?？諝饬鲃?dòng)只會從外向內(nèi)，那么實(shí)驗(yàn)室里的污染就不會擴(kuò)散到外界，可以保證實(shí)驗(yàn)室外面的安全。

與病毒“擦肩而過”或只有2毫米

拿到“身份證”的核酸樣本并不能直接測試，而是要先提取核酸，對其進(jìn)行擴(kuò)增。因此，核酸樣本“奇幻漂流”的下一站，是PCR加樣區(qū)——簡單來說，檢驗(yàn)人員要把病毒的遺傳物質(zhì)（核糖核酸）給“揪出來”。

此時(shí)，檢驗(yàn)人員戴著雙層手套，在生物安全柜內(nèi)一管一管地?cái)Q開螺旋蓋，手工吸取樣本，加入核酸提取板孔中，再擰上螺旋蓋將標(biāo)本放回原處?！坝卸嗌俜輼颖揪陀卸嗌俅蔚闹貜?fù)操作?！眳俏木暾f。那時(shí)，檢驗(yàn)人員與新冠病毒“擦肩而過”的距離可能只隔著兩層乳膠手套——也就是2毫米，但核酸檢測工作不允許他們害怕。

檢驗(yàn)人員正在進(jìn)行核酸提取環(huán)節(jié)中的加樣步驟

獲得核酸后，檢驗(yàn)人員用移液槍將核酸轉(zhuǎn)移至事先準(zhǔn)備好反應(yīng)液的反應(yīng)管里，制成反應(yīng)體系，讓它進(jìn)入“奇幻漂流”的下一站：擴(kuò)增分析區(qū)。

“不能出錯(cuò)，不能有遺漏，不能發(fā)生生物安全事故?？梢哉f檢驗(yàn)人員全身時(shí)刻處于高度緊張的狀態(tài)。就單說‘加樣’，檢驗(yàn)人員要用極小的槍頭將每個(gè)提取好的核酸，大概是一滴水的四分之一加入到試劑中，每一步操作都必須十二分謹(jǐn)慎?！眳俏木旮嬖V記者，“我們迫切希望能有開蓋、加樣的儀器來‘解放’檢驗(yàn)人員，可現(xiàn)有的儀器在速度上并不能令人滿意，遇上大樣本篩查只能靠手工操作?！?/span>

讓它變多才能檢測出來

經(jīng)歷了復(fù)雜費(fèi)時(shí)的前期制備過程，樣本終于來到了“奇幻漂流”的關(guān)鍵一站。樣本的采樣質(zhì)量如何、核酸提取的質(zhì)量如何、結(jié)果如何都將在此處見分曉。

這里不得不提一下曾斬獲諾貝爾獎(jiǎng)的聚合酶鏈反應(yīng)（PCR），這是20世紀(jì)80年代中期發(fā)展起來的一項(xiàng)體外核酸擴(kuò)增技術(shù)，它可以將目標(biāo)基因片段于數(shù)小時(shí)內(nèi)擴(kuò)增百萬倍至數(shù)億倍，成為當(dāng)今生命科學(xué)研究最為重要且廣泛使用的技術(shù)手段之一。

怎么理解擴(kuò)增？

如果把樣本提取出來的核酸看作是一塊土地，新冠病毒是種子，如何知道土地里有沒有種子？簡單的方法是，加點(diǎn)水和肥料（試劑），讓種子一個(gè)變兩個(gè)、兩個(gè)變四個(gè)、四個(gè)變八個(gè)……“病毒是看不到的，而且微量樣本也不容易檢測到，所以要讓它變多，才方便檢測出來?！眳俏木杲忉?。

經(jīng)過復(fù)雜的前期制備工作，才能在PCR儀上進(jìn)行擴(kuò)增檢測。上機(jī)后，就是歷時(shí)約1.5小時(shí)擴(kuò)增檢測，而且中間不能有停頓、不能有斷電、不能有儀器故障，核酸檢測才能完成

當(dāng)反應(yīng)管在機(jī)器上開始檢驗(yàn)后，也就意味著“開弓沒有回頭箭”——從采樣到核酸制備任何一個(gè)環(huán)節(jié)出現(xiàn)問題都可能導(dǎo)致返工重測，從而使報(bào)告時(shí)間加倍。

3月15日，國家衛(wèi)健委發(fā)布《新型冠狀病毒肺炎診療方案（試行第九版）》。其中，《方案》將解除隔離管理和出院標(biāo)準(zhǔn)修改為“連續(xù)兩次新型冠狀病毒核酸檢測N基因和ORF基因CT值均≥35（熒光定量PCR方法，界限值為40，采樣時(shí)間至少間隔24小時(shí)）”，這也讓很多“小白”知道，這兒的“CT”并非到醫(yī)院拍個(gè)CT，而是指擴(kuò)增的閾值。“簡單來說， CT值越低，說明陽性越強(qiáng)；CT值越高，說明陽性越弱。”

作為初篩實(shí)驗(yàn)室，只能向疾控中心報(bào)告“疑似陽性”?！拔覀儠T值登記報(bào)告，上報(bào)相應(yīng)區(qū)域的疾控部門。隨后根據(jù)疾控的要求轉(zhuǎn)運(yùn)原管標(biāo)本以供復(fù)核?！眳俏木暾f，而PCR實(shí)驗(yàn)室也會通過紫外線消毒。據(jù)介紹，通常陰性樣本會儲存一兩天以備查驗(yàn)。

向你飛奔而來的報(bào)告背后是汗水

走到這，核酸樣本的“奇幻漂流”之旅并沒有結(jié)束。檢測人員需要對擴(kuò)增結(jié)果進(jìn)行分析：包括同批隨樣本檢測的陰陽性質(zhì)控結(jié)果是否在控、基線設(shè)置、逐孔分析內(nèi)標(biāo)及樣本結(jié)果是否正常等。當(dāng)陰陽性質(zhì)控全部符合檢測要求，排除假陰性、假陽性可能，對異常結(jié)果樣本及時(shí)進(jìn)行復(fù)核，確保無誤后才能最終報(bào)告結(jié)果，并上傳到健康云。

有人好奇，健康云核酸結(jié)果查詢里，“OFR1a/b陰性，N基因陰性”是什么意思？吳文娟解釋，這是新型冠狀病毒核酸的兩個(gè)特異性片段，“一般同一份標(biāo)本中兩個(gè)基因檢測結(jié)果均為陽性，會判斷為陽性，單基因陽性則需復(fù)檢。”

這幾天，PCR實(shí)驗(yàn)室里的檢驗(yàn)人員都在超負(fù)荷工作

“現(xiàn)在我們檢驗(yàn)科的工作包括了‘愿檢盡檢’——市民需要核酸陰性報(bào)告這張‘通行證’的；‘應(yīng)檢盡檢’——住院患者和陪護(hù)，還有醫(yī)院承擔(dān)的密接、次密接及高風(fēng)險(xiǎn)人群的核酸檢測。這幾天，還有網(wǎng)格化篩查的任務(wù)。”吳文娟的語氣里透露著疲憊。

那儀器運(yùn)行時(shí)，檢測人員能輕松一會兒嗎？并不是，此時(shí)，新的一批樣本又來了，又要開始錄信息，提核酸，加樣……吳文娟說，隨著核酸樣本量不斷增大，檢驗(yàn)人員一直是在超負(fù)荷運(yùn)轉(zhuǎn)。

“防護(hù)服是不透氣的，全身罩在里面，剛穿上就會很熱。加之機(jī)器一刻不停，熱量積聚一天后整個(gè)實(shí)驗(yàn)室會非常悶熱，即使開著空調(diào)室內(nèi)溫度也會達(dá)到28-30℃。此外，實(shí)驗(yàn)室里靜電也很強(qiáng)烈，因此也特別干燥?！彼f，“我們中的很多人已經(jīng)連續(xù)幾天都沒有回過家了，大家都是‘5+2’‘白+黑’的節(jié)奏在工作，能夠躺下來休息一會，就覺得很滿足了。”